Патология сперматозоидов хорошо констатируется. Метод окрашивания эозиннигрозином может быть также использован и для изучения морфологии сперматозоидов, применяя ту же технику, как и с тушью. Число сперматозоидов, показывающих морфологические, атипичные признаки, регистрируется, как процент ненормальных сперматозоидов.
рH нормальной собачей спермы колеблется от 5,8 до 6,9, если определять сразу же после ее сбора. Если сперму сохранять, то она становится более кислой. Средняя цифра рН собачей спермы, получаемая от трех исследований, составляет 6,75. Породных различий не отмечается. Если каждую из трех фракций спермы исследовать раздельно, то средние цифры рН будут следующими:
1-я фракция — 6,37
2-я фракция — 6,10
3-я фракция — 7,20
Сперму от собак получали ежедневно на протяжении 18 дней. Никаких добавлений в прежней диете собаки не получали. В конце опытов собаки были здоровы и не проявляли болезненных явлений от ежедневных эякуляций.
Результаты влияния частоты получения спермы на объем эякулята изображены в графике № 1 (рис. 119).
Влияние частоты получения спермы от собак на густоту спермы изображено в графике № 2 (рис. 120).
Влияние частоты получения спермы от кобелей на подвижность изображено в графике № 3 (рис. 121).
Через 5 дней после окончания опытов сперма вновь была получена, результаты исследования которой были следующими:
объем — 11,5
подвижность — 4
густота — 115 млн. в 1 мл.
Известна и скорость выделении спермы у самцов разных пород. Она зависит не только от породности, по и от индивидуальных особенностей собаки. Разница в скорости выделения как у о дольных пород, так и индивидуумов наблюдается в основном в третьей фракции.
Время выделения первой фракции 30–50 секунд. У нормального самца вслед за первой фракцией следует вторая и продолжается 50–80 секунд. Третья фракция следует за второй и продолжается от 3 до 30 минут.
Первая фракция является в основном смазочным материалом.
Вторая фракция содержит половые клетки кобеля.
Третья фракция — секреция предстательной железы является посредником, в котором сперматотозоиды продвигаются до участка оплодотворения.
При исследовании третьей фракции намечена разница в pH в различных случаях. Щелочность третьей фракции, по-видимому, активирует более кислые спермопосители второй фракции. Если каплю второй фракции поместить на теплое предметное стекло и зучить под микроскопом, то можно наблюдать вполне хорошую степень подвижности. Но эта подвижность значительно увеличивается, если к изучаемой сперме добавить каплю третьей.
У нормального самца густота спермы очевидно будет варьировать с объемом в зависимости от количества простатической жидкости, которая содержится в выделении. Это и объясняет большие объемные вариации, полученные у исследователей многие из которых всю простатическую жидкость не собирали и изучали более высокую густоту.
Скорость выделения спермы у кобелей доказывает некоторые интересные предположения. Согласно цифрам, полученным в течение этих исследований, собаки выделяют свои первые и вторые фракции в течение 70 секунд и удивляешься, как много сильных, но неопытных самцов были признаны негодными, как стерильные, потому что они выделяли фракции первую и вторую при их первом половом возбуждении до спаривания с сукой. Здесь следует отметить, что не каждый самец будет реагировать самопроизвольно на сбор спермы независимо от метода применения. Некоторые самцы, имеющие нервный нрав, требуют время для того, чтобы они могли успокоиться и привыкнуть к окружающей обстановке до того, как они будут выделять сперму. Поэтому неразумно признавать кобеля неполноценным в половой активности, если он отказывается выделять сперму при первой потребности. Даже если самец реагирует немедленно, из этого не всегда следует, что первые выделения являются характерным образцом качественных показателей его спермы.
Что касается влияния частоты выделения (что было иллюстрировано ранее) на качество спермы, то следует помнить, что кобеля для воспроизводства ежедневно использовать нельзя. Вязку можно допускать 2–3 раза в неделю с соответствующими периодами отдыха, которые необходимы для получения здоровой спермы. Более частое использование самца в течение длительного периода поведет к ухудшению качества его спермы, в которой появятся ненормальные по форме типы незрелых сперматозоидов.
Сохранение жизни сперматозоидов вне организма очень кратковременно. Свежая неразбавленная сперма должна быть использована не позднее, как через 30 минут после ее получения. Продолжительность пригодности спермы может быть продлена ее разбавлением. Лучшим разбавителем спермы собак является пастеризованное молоко, которым в подогретом виде разбавляют сперму 1:8.
Известно, что некоторые теплокровные животные (суслик, тушканчик, сурок и др.) на зиму засыпают и в это время расходуют очень мало энергии. Температура их тела в это время 9–11°.
В основу хранения спермы также положено влияние низких температур, как задерживающего фактора в регуляции обмена веществ в живых организмах.
В сперме кобеля из-за слабой кислотности среды ослабление жизненных процессов (до анабиоза) почти невозможно. Вследствие непрерывного движения сперматозоиды при температуре тела быстро расходуют свои жизненные функции.
Кроме того, под влиянием большого количества секрета предстательной железы у сперматозоидов разрушается липоиднан оболочка. Вот почему при хранении спермы собаки надо устранить вредное влияние секрета этой железы и создать явление анабиоза.
Сохранять сперму собак при низкой температуре следует в разбавленном виде. Для охлаждения спермы используют специально сконструированные для этой цели термосы. Во избежание температурного шока усперматозоидовохлаждатьспермунеобходимо постепенно, избегая резких температурных скачков. Термос заполняют кусочками льда, куда в вертикальном положении помещают пробирки со спермой, залитые сверху слоем (1–2 см) чистого медицинского вазелинового масла, а затем закрытыми проваренными в парафине пробками (резиновые пробки не применяют). Пробирки должны быть обвернуты ватой.
Пополнение термоса льдом производят в зависимости от температуры окружающего воздуха примерно через следующие промежутки времени:
25–40° — 8 часов
18–24° — 24 часа
13–17° — 48 часов (2-е сутки)
9–12° — 3-е суток
К хранению допускают сперму со следующими показателями: концентрация сперматозоидов — не менее 80 млн. в 1 мл; активность не менее 4 баллов; продолжительность иереживаемости 36–48 часов. Сперма собаки при 4° сохраняется до 100 часов, но желательно ее использовать через 36–48 часов после получения.
Перед использованием сохраненную сперму обязательно исследуют. Для этого берут из пробирки каплю спермы, помещают ее на предметное стекло, добавляют к ней каплю 1 % раствора хлорида натрия и прикрывают покровным стеклом. Микроскопируют в специальной камере подогретой электрической лампочкой при температуре 40°. Для этой же цели можно воспользоваться и обогревательным столиком.
Основной трудностью осеменения является своевременность доставки спермы к суке, находящейся в стадии полового возбуждения. При современных видах транспортировки расстояние, на какое перевозится сперма, не имеет значения.
Транспортными средствами могут быть: велосипеды, лошади, автомобили, вертолеты, самолеты, почтовые голуби и другие. При перевозке сперму необходимо предохранять от переохлаждения и перегревания (поэтому обычно перевозят в термосах) без вибраций и резких встряхиваний, которые отрицательно действуют на сперматозоиды.
Пробирки со спермой должны быть снабжены ордером, где указано время получения спермы (дата и часы), кличка кобеля, порода, доза и оценка спермы. Перед осеменением доставленную сперму надо исследовать на определение ее качества, как это проделывают и со спермой после ее хранения.